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解码leadonano游离 DNA 提取的卓越特质



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 Leadonano游离 DNA 提取试剂盒使用利用纳米磁珠技术来富集和纯化超低浓度的细胞游离 DNA。与其他传统技术供应商相比,这款用于遗传物质分离的细胞游离 DNA分离试剂盒不仅显著提高了产量,而且不受目标核酸片段大小的影响,不存在偏向性。

·0.1mL 4 mLcfDNA

·整。

·仿β-

·使

·广EDTAcfDNA 

 

测试数据


01Leadonano、Qiagen 血浆 cfDNA 回收率对比

图1

1.EDTA抗凝管、Streck管、康为世纪管保存的血浆都可以高效稳定的富集纯化cfDNA 。


2.使用Leadonano游离DNA提取试剂盒分别提取EDTA、Streck、康为世纪游离DNA保存管中血浆中的游离DNA,每种样本重复5次,用ddPCR检测EFGR基因片段的数量。


3.用qiagen的游离DNA提取试剂盒重复上面的步骤。


4.设qiagen的ddPCR拷贝数目(回收率)结果为100%,将leadonano与qiagen的提取回收效率进行对比后得图1,可见Leadonano游离DNA提取试剂盒能完全替代qiagen游离DNA提取试剂盒。

02不同样本、浓度的 DNA 片纯化回收率、稳定性、精密度高


1.将Homo sapiens actin DNA片段 (147bp) 分别加入1mL的纯水(黄色),TE 溶液 (绿色) ,Streck保存的血浆(青色),EDTA抗凝的血浆(蓝色),尿液(紫色), 得到不同浓度的样品(100 fg/uL, 10fg/uL,1fg/uL,0.1fg/uL, 0.010fg/uL,0.001fg/uL) 。


2.使用粒度生物游离DNA试剂盒对DNA片段进行富集分离,得到终体积为100uL 的产物进行qPCR并进行对比。 


A) 扩增图(Amplification plot)显示各种溶液(TE,纯水,血浆,尿液)稀释的DNA片段经过粒度生物高效游离DNA富集分离液与原液高度重合。 


B) DNA片段原液产生的 qPCR 标准曲线和粒度生物高效游离DNA富集分离的DNA片段重合度非常高,在各浓度下,目标DNA检测均实现高效回收,回收率均 >90%。 


03稳定性评估—leadonano提取试剂 

企业参考品1

             企业参考品2

            企业参考品3

•企参1和2提取效率≥85%

·企参3 CP-ACTB均在3SD(20±0.56)内变化 

•提取试剂37度加速老化4周,试剂稳定   

图层 9.png          

04不同浓度片段DNA,qubit检测线性关系 



•ladder浓度在0.05-2ng/ul范围内,qubit检测符合线性

•电泳结果,每个片段的DNA都被提取到

•(cfDNA主峰在174bp左右


image.png

         

1.将1KDNA ladder稀释不同倍数后加入血清。


2.使用Leadonano专利生产的纳米磁珠进行DNA富集分离


3.使用BioAnalyzer 2100 (Agilent)进行原来的Ladder和经过富集纯化的1K DNA ladder电泳比较。


4.纯化前和纯化后的结果高度一致

05二代测序建库的文库质量指标

图层 30.png

样本测序对比图

1.取临床的孕妇外周血核酸离心后的血浆600微升两份样本。


2.使用 Leadonano 和 Q 公司的游离 DNA 提取试剂盒,分别对游离 DNA 进行富集纯化,加接头建库后开展二代测序及结果分析,测试二代测序文库质量。


3.leadonano胎儿游离DNA浓度更优于Q公司的水平。



产品信息



Leadonano游离DNA试剂盒采用自主研发的磁珠纯化技术和独特的缓冲液系统,针对血清、血浆样本中短片段游离DNA富集定向优化,旨在为用户提供安全、便捷,高灵敏、高质量的核酸提取方法。

     粒度生物

上海粒度生物科技有限公司致力于原材料的研发生产应用,开发用于生物分离纯化、生物检测和生物医疗的新产品,主要包括免疫磁珠、基础磁珠、核酸提取试剂盒、生物耗材等。

产品广泛应用于分子诊断样本前处理、细胞磁标记示踪、细胞磁分选、核酸磁分离、磁/荧光免疫层析检测、化学发光检测、免疫共沉淀、磁共振成像、CT造影、超声成像、光声成像、暗场成像、表面增强拉曼检测、光热治疗和磁感应热疗等领域,所有产品均为自主研发,保证公司提供的产品性价比高。

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