答：可以采用以下的缓冲液进行替换 结合缓冲液:PBST （150mM PBS，150mM NaCl，0.1% (v/v) Tween-20，pH7.2）； 洗脱缓冲液:甘氨酸缓冲液 （0.1M Glycine，0.1% (v/v) Tween-20，pH2.5）； 保存缓冲液： （50mM Tris-HCl，0.1%(v/v) Tween-20，0.01%(w/v) NaN3，pH7.5）； 洗涤缓冲液： （50mM Tris-HCl，0.1%(v/v) Tween-20，pH7.5）； 再生缓冲液： （1% (v/v) TritonX-100，PBS）； 中和缓冲液 ：（ 1M Tris-HCl，pH9.0）。
答：取30mg组织样本进行核酸提取并测量，核酸提取产量应2~20μg。
答：提取产量：取200μL全血样本进行核酸提取并测量，核酸提取产量应2~20μg。核酸纯度：取企业参考品200μL进行核酸提取并测量，OD260/OD280应在1.7～2.0范围内、OD260/OD230应1.6～2.5范围内。精密度：对企业精密度参考品进行核酸提取，用指定的荧光PCR检测试剂盒扩增提取产物，Ct值的变异系数（CV）≤5%。
答：1. 将 MM101 通过涡旋或者超声作用分散，得到均匀的分散液。取用所需量 的微球（例如 10mg）加入容器中，加水稀释至 10mg/mL 。 2. 将容器置于磁性分离器分离 1 分钟（必要时延长分离时间），待完全分 离后吸除液体。 3. 加入 1 mL 偶联反应液，将微球重新涡旋（超声）分散均匀。 4. 加入 100μL 偶联剂，涡旋（超声）分散均匀。 5. 将容器置于翻转混匀器，继续在室温下反应 30 分钟。 6. 按照步骤 2 中的方法除去液体。 7. 加入 1 mL 偶联反应液，将微球重新涡旋（超声）分散均匀。 8. 加入 200μg 抗体，涡旋（超声）分散均匀。 9. 在翻转混匀器上继续于室温下反应 3 小时。 10. 按照步骤 2 中的方法除去液体。 11. 加入 1mL 的清洗液，并涡旋（超声）分散均匀。 12. 按照步骤 2 中的方法除去液体。 13. 重复步骤 11-12 共计 4 次。 14. 选用合适的缓冲液将微球重新分散，并在 2-8℃下保存。 清洗液: TBS-T (25 mM Tris-HCl 缓冲液， pH 7.2， 0.15 M NaCl， 0.05 % Tween20) 偶联剂: 10 mg/mL EDC 以及 15 mg/mL NHS 用偶联反应液一并溶解， 现用现配。(EDC: 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐，NHS:N羟基琥珀酰亚胺) 装置: 磁性分离器，超声清洗器，涡旋混合仪，翻转混匀器。
答：【蛋白 偶联羧基磁性微球实验步骤】1、取 10 mg 磁性微球至离心管中，磁分离去除上清，加入 MES（0.015M pH=5.0）1mL 重悬，水浴超声 20秒。磁分离，弃上清，加入 1 mL MES（0.015M pH=5.0）重悬，并水浴超声 20 秒，定容到 10mg/mL（重悬至 1 mL）；2、涡旋加入 0.35 mg 蛋白，震荡混匀后，置于 37℃控温摇床中振荡 30 min；3、称取 10 mg EDC，将吸附 SA 的磁珠直接加入到 EDC 中，振荡混匀后，水浴超声 20s，继续在摇床中振荡 5 h。4、磁分离后留取 1 mL 上清测紫外吸光度，并计算上清中 SA 的含量；5、加入 1 mL 的 CB（0.1M pH=9.0）溶液重悬磁珠，水浴超声 20s，摇床振荡 30 min，磁分离，上清留测紫外，并计算上清中 蛋白 的含量；6、加入 1 mL 的 PBST（0.015M pH=7.4 含 1%Tween-20）溶液重悬磁珠，水浴超声 20s，摇床振荡过夜，磁分离，上清留测紫外，并计算上清中 SA 含量，通过投料量和累积上清 SA 含量计算出 SA 的偶联率。7、在第 2 下午 15:30-16:30，第 3 天的早上 8：00-9:00 间，和下午 15:30-16:30 间各更换一次 PBST（0.015MpH=7.4 含 1%Tween-20），更换后水浴超声 20 s。于第三天第 2 次将磁珠取出，磁分离去除上清。8、加入磁珠保存液（PBST+1%BSA+0.1%NaN3）重悬磁珠，定容至 10 mg/mL。
答：封端剂通常涂覆在小珠（通过吸附）偶合反应如下。这些化合物所使用，以减少样品中的涂覆的磁珠与非靶标分子之间的非特异性相互作用（蛋白质和聚合物表面之间如疏水相互作用）。所述封闭剂应仔细选择，以确保它是有效的最小化非特异性相互作用;某些封闭剂可能会干扰测试/测定中，或实际上促成了非特异性结合。封闭剂浓度进行评估，以确保有足够的阻塞（尤其是 在光捕获分子的涂层水平），没有活性的明显损失的。封闭剂通常添加到存储缓冲器中的不同量的标准浓度为从0.05％到0.1％（重量/体积）。在更高浓度阻滞剂（达1％）的单独孵育还建议存储之前，以饱和的微球体的暴露表面。一些常用的封闭剂包括：A。BSA（牛血清白蛋白）：通常单独使用，但可以与其他阻滞剂结合起来，最常用的表面活性剂。 B。酪蛋白：一种基于乳的蛋白质，含有原生物素，其应当与涉及生物素，以防止干扰系统时，应注意避免。 C。 Pepticase（酪蛋白酶解产物）：酪蛋白的酶促衍生物，它也应该与涉及生物素系统工作时避免。 D。非离子表面活性剂：吐温20和Triton™X-100是典型的。 当与另一种封闭剂使用的，常见的比例是1％封闭剂; 0.05％的表面活性剂。 E。IgG：缀合特异性IgG，以微球时经常使用。例如，如果耦合小鼠IgG，兔（或任何非交叉反应的抗体）可以吸附作为封闭剂。 F。 FSG（鱼皮明胶）：纯明胶或明胶水解产物也可使用。 克。 PEG（聚乙二醇）：一个非常多才多艺的拦截器，在一些规模（MW，链长），配置及收费用。 H。血清：非交叉反应血清，如马或鱼血清，都是在交叉反应的各种类型的抗体的术语高度惰性的。 I。商业阻滞剂：许多公司提供制剂，其是各种分子量的两种或更多种单封闭物质的复合物，并且其可以有效地在宽范围的条件下使用。这些不同的商品名称出售，而大多数化学厂商将推出多种。 有许多额外的封闭剂，因此我们建议尝试用不同的组合和浓度。
答：可以用EDC/sulfo-NHS的方法偶联，这个方法比较成熟，但是涉及到在纳米颗粒偶联的时候其实最主要的是要保持颗粒的稳定性，颗粒的稳定性与电荷有很大关系，所以用不同等电点的蛋白质进行偶联在反应缓冲液pH上是不同的，所以我们没办法做出相应的试剂盒。到时候我们会提供一个大概的偶联步骤，里面有试剂、蛋白质、偶联剂的用量和缓冲液的信息等，基本您可以照着做，针对您的蛋白质您还可以稍做一些调整，尤其是缓冲液的选择。如果您实在不愿意做的话，也可以交给我们公司帮您做，公司也有定制化的业务，但需要另外收费。
答：用稀释的微球悬浮（≤1％固体），以确保您可以形成单颗粒，包被颗粒，所以不容易团聚.〜0.1毫克/毫升的浓度 蛋白质可能不足以实现单结合层，我们建议您添加一个3-10倍的蛋白质。
答：IgG的吸附应该在Tris缓冲液（pH值=8.0）和磷酸盐缓冲液（pH= 7.4）。不同pH, IgG的Fc和Fab部分吸附不同.因此，可以安排的Fc部分的最佳吸附，和Fab吸附的相对抑制，通过选择微碱性pH，某些单克隆抗体具有很低的（酸性）的等电点。
答：所涉及的分析物将部分决定检测模式的类型。 例如，分子的分子量<6000可能难以用夹心发检测，因为它两种抗体，很难适应于这样的小分子。药物测试一般是通过抑制或竞争性结合形式进行。 大量的分析物，如蛋白质，可通过直接或抑制试验测定。
答：微球，乳胶颗粒，或磁珠是目前可用直径跨度>6个数量级，从约15nm至25mm（0.015 - 25,000微米）。它们是由各种材料（聚合物和矿物质）制成，其密度为〜1>为2g /毫升，可以偶联多种表面化学物质。
答：超顺磁性微球有不同的大小，粒度分布，表面化学性质，以及强度（可调响应于磁体）。最新的用纯聚合物包覆核/壳,，以防止铁免于与敏感的酶接触。
